内参基因的筛选

筛选内参基因


选择内参基因的标准:


1.    高度或中度表达,排除太高或太低


2.    表达水平不受任何外源因素影响


3.    不存在假基因


    由于时空的变化,RNA的表达水平并不恒定的,细胞周期的不同阶段内以及不同类型的细胞或组织都可能存在差异。因此需要根据实际研究的细胞和组织类型以及实验要求,从多种内参基因中筛选出适合自己实验的稳定表达的内参基因,同时也可以选择多内参基因的研究方法,设置两个或两个以上的内参基因,取均值后校正目的基因,从而得到更可靠的结果。


    如果与前人研究的物种相同,可直接利用文献中选择的内参基因;如果没有已知可用的内参基因,可用选择多个管家基因进行内参基因的筛选与验证,一般的流程是:


1.    选择多个候选的内参基因


2.    针对这些基因进行实时荧光定量PCR


3.    分析这些内参基因的表达稳定性以及变异系数等


4.    确定最优内参基因进行后续实验


 


  • 发表于 2018-05-17 13:18
  • 阅读 ( 5764 )
  • 分类:实验相关

你可能感兴趣的文章

相关问题

0 条评论

请先 登录 后评论
Daitoue
Daitoue

167 篇文章

作家榜 »

  1. omicsgene 702 文章
  2. 安生水 350 文章
  3. Daitoue 167 文章
  4. 生物女学霸 120 文章
  5. xun 82 文章
  6. 红橙子 78 文章
  7. rzx 76 文章
  8. CORNERSTONE 72 文章