blast比对软件使用

BLAST比对原理就是基于序列的相似性,推断该序列的同源基因,又根据同源基因具有相同功能,从而达到功能注释的目的,这个方法往往是有效的。尽管方法会误判(假阳性)或漏判(假阴性),但目前还没有能替代相似性推断同源性的方法,只能通过设置合理的阈值,尽量减少假阳性和假阴性的发生。但相似性并不能证明同源性。

一、下载

下载地址:ftp://ftp.ncbi.nlm.nih.gov/blast/executables/blast+/LATEST

选择需要的版本进行安装即可

二、使用

1. 建库

makeblastdb -in genome.cds.fa -dbtype nucl -title genome.cds.fa #DNA序列makeblastdb -in genome.pep.fa -dbtype prot -title genome.pep.fa #蛋白质序列

说明:

-in:建库序列

-dbtype:数据库类型

以蛋白质序列为例,运行结果:

attachments-2021-02-xSIakEvA60334e1ec61eb.png


2 . 比对 

blastall -i Aphidoidea.fa -d genome.cds.fa -p blastn -e 1e-10 -b 5 -v 5 -m 8 -o yachong.blast

说明:

-i:需要比对的文件的路径 

-d:数据库的路径 

-e:期望值,这一参数控制搜索的灵敏度

-b:设定输出文件中,最多显示多少个query-subject两两比对文本描述,默认值 为250

-v:设定输出文件中,匹配列表最多显示多少个subject,默认值为500

-m:设定搜索结果的显示格式,m参数的选项有12个(通常用-m8格式)

-o:输出文件的路径

-p : 可选择blast的方法:blastp,blastx,blastn


-pquery
database
blastn
核酸
核酸
blastp
蛋白质 
蛋白质
blastx
核酸 
蛋白质
tblastn
蛋白质
核酸 


3.比对结果:

运行代码之后,会生成文件 yachong.blast,文件内容如下:

attachments-2021-02-JIvb28Hd60334e554cd9a.png

一共有12 列,分别代表:

1、Query id:查询序列ID标识

2、Subject id:比对上的目标序列ID标识

3、% identity:序列比对的一致性百分比

4、alignment length:符合比对的比对区域的长度

5、mismatches:比对区域的错配数

6、gap openings:比对区域的gap数目

7、q. start:比对区域在查询序列(Query id)上的起始位点

8、q. end:比对区域在查询序列(Query id)上的终止位点

9、s. start:比对区域在目标序列(Subject id)上的起始位点

10、s. end:比对区域在目标序列(Subject id)上的终止位点

11、e-value:比对结果的期望值

12、bit score:比对结果的bit score值

注意:结果会出现一条查询序列与多条目标序列相似的情况,挑选打分高即可(红色线条部分);还会出现一条查询序列与同一条目标序列不同位置相似的情况(黄色线条部分)。

attachments-2021-02-N5jwWrYk60334fa5055a3.png

此外:

blast还有在线版:https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi

使用参考:https://www.omicsclass.com/article/1192


此外,我们在网易云课堂上有各种教学视频,有兴趣可以了解一下:

1. 文章越来越难发?是你没发现新思路,基因家族分析发2-4分文章简单快速,学习链接:基因家族分析实操课程

2. 转录组数据理解不深入?图表看不懂?点击链接学习深入解读数据结果文件,学习链接:转录组(有参)结果解读转录组(无参)结果解读

3. 转录组数据深入挖掘技能-WGCNA,提升你的文章档次,学习链接:WGCNA-加权基因共表达网络分析

4. 转录组数据怎么挖掘?学习链接:转录组标准分析后的数据挖掘

5. 微生物16S/ITS/18S分析原理及结果解读

6. 更多学习内容:linux、perl、R语言画图,更多免费课程请点击以下链接:

http://m.study.163.com/provider/400000000234009/index.htm?share=1&shareId=1433306807

  • 发表于 2021-02-22 14:29
  • 阅读 ( 4103 )
  • 分类:软件工具

0 条评论

请先 登录 后评论
Morii
Morii

15 篇文章

作家榜 »

  1. omicsgene 698 文章
  2. 安生水 347 文章
  3. Daitoue 167 文章
  4. 生物女学霸 120 文章
  5. xun 82 文章
  6. 红橙子 78 文章
  7. rzx 74 文章
  8. CORNERSTONE 72 文章