siRNA
什么是siRNA ？
siRNA（small interfering RNA 小干扰RNA） 是由 20-25 个核苷酸组成的双链 RNA 分子。一般3’端有两个游离的碱基，通过RNA干扰途径沉默目标基因。
RNA干扰（RNAi）
在RNA干扰...
什么是siRNA ？
siRNA（small interfering RNA 小干扰RNA） 是由 20-25 个核苷酸组成的双链 RNA 分子。一般3’端有两个游离的碱基，通过RNA干扰途径沉默目标基因。
RNA干扰（RNAi）
在RNA干扰通路中，siRNA 通过与互补 mRNA 分子杂交干扰基因表达。这种干扰会触发 mRNA 降解，进而抑制特定基因的基因表达。
人工合成siRNA
siRNA 于 1999 年由 David Baulcomb 实验室首次发现。
2001 年，Thomas Tuschl 提出合成 siRNA 会在哺乳动物细胞中诱导 RNA 干扰 (RNAi)。
如今，专门设计用于与 RNA 靶序列杂交并使其降解的“合成”siRNA 寡核苷酸已被广泛用于诱导细胞 RNAi。靶 mRNA 的降解能够有效“敲除”相应蛋白质的表达。然后可研究分析靶蛋白浓度降低造成的影响。
siRNA 的作用原理：
将双链 RNA (dsRNA) 引入细胞。
细胞中的 Dicer 蛋白将 dsRNA 消化为 21 bp 的 dsRNA (siRNA)。
siRNA 被整合到 RNA 诱导沉默复合体 (RISC) 中。
在 RISC 复合体中，dsRNA 发生链分离。
其反义链与细胞中的互补/靶 mRNA 杂交。
活化 RISC 中的核酸酶降解靶 mRNA。
断裂的 mRNA 无法翻译成蛋白质。也就是说蛋白质无法表达，从而成功“敲除”蛋白质。
- 发表于 2023-10-18 14:16
- 阅读 ( 838 )
- 分类：smallRNA
