细胞培养是生物技术中最核心,最基础的技术,而细胞因子的添加,则是整个细胞培养过程中的重要环节,如何选择正确、优质、可靠的细胞因子对后续实验,如肿瘤、免疫、干细胞等相关研究都至关重要。
特别是如今干细胞治疗、CAR-T细胞治疗等领域非常火热,对细胞因子的要求就更高了,需要大家从细胞因子的种类、来源、生物学活性和用法的各个环节进行严格把控,如今市场上的细胞因子产品琳琅满目,质量也良莠不齐,到底怎么才能选到合适且优质的细胞因子呢?今天,学霸姐姐就带你了解一下。
选择细胞因子需要注意哪些问题?
首先,你应该根据实验目的及细胞因子的功能和特性来确定细胞因子的种类,这一步,基大家基本上应该是没有问题的。
那么,知道所需细胞因子种类后,又该如何从市面上琳琅满目的品牌中进行选择呢?小编建议您参考以下几点:
一、生物学活性
在使用细胞因子进行实验时,生物学活性往往以units/ml或ED50为单位。然而,由于每个厂家的生产工艺和活力测定方法的不同,细胞因子活性也不尽相同,因此,如何标准化您的实验结果来降低每次使用的误差就显得尤为重要。
细胞因子活性测定标准不同经常导致细胞因子的过量使用,比如在很多情况下,细胞因子使用量从100 IU/ml到1000 IU/ml,均可达到相同的细胞刺激效果。因此,使用统一的活性认定标准是非常重要的。
所以,如果厂家提能够供每个批次细胞因子的生物活性,您就可以更准确地添加而不造成浪费。
二、表达系统
最常用的细胞因子表达系统是大肠杆菌表达系统和哺乳细胞表达系统,此外还有酵母表达系统和昆虫表达系统等。
目前,临床和实验室应用的细胞因子大多来源于大肠杆菌。选择表达系统之前需要充分了解自己的研究目的,根据应用来选择最合适的表达系统。
例如有些蛋白需要经过翻译后修饰才具有活性,哺乳动物细胞可以提供这样的修饰,但细菌细胞往往不能。
因此,在选购这类蛋白时更要特别留意产品说明书中的蛋白来源。
三、质量指标
细胞因子的质量对实验的影响不容小觑,一旦选择失败将直接导致实验无法顺利开展,浪费时间和精力,因此选择质量有保证的产品至关重要,好的品牌会对其蛋白产品进行各种质控,以确保蛋白的品质和实验效果。
若用来作为动物免疫抗原进行检测类抗体的研究,纯度大于80%即可;若用于晶体及晶体结构研究,纯度要大于95%。
在挑选级细胞因子时,相信以上3个关键点有助于大家练就一双「火眼金睛」,从不同的生产商那里挑选出高品质的产品,进而让细胞实验更高效。
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灵活性:多种规格选择,毫克级现货供应;
可靠性:严格的产品质控体系,细胞培养实验验证产品有效性。
好了,学霸姐姐只能帮你到这里了,剩下的,就靠你自己了!
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