转录组早已走进了千千万万的实验室,但是转录组文章却越来越难发,以至于有人发出这样的疑问“转录组还能发文章吗?”带着这个疑问,小编亲去求证,发现转录组文章还是可以发,但是文章内容有了新变化,一起来看一下吧!
小编打开熟悉的期刊BMC Genomics,映入眼帘的一篇3月12日见刊的题为“Transcriptomes analysis reveals novel insight into the molecular mechanisms of somatic embryogenesis in Hevea brasiliensis”转录组文章,内容难易适中,很有代表性,那就让我们一起看一看,6个转录组样本,每个重复3次,是如何发到BMC Genomics的吧!
本文实验材料是橡胶树,一种重要的经济林木,研究关注点是橡胶树无性繁殖过程中体细胞胚发育的6个不同阶段或形态(胚性愈伤组织(EC)、原胚(PE)、子叶胚(CE)、异常胚(AE)、成熟子叶胚(MCE)和枯萎异常胚(WAE))的基因表达模式变化。每个阶段一个样品,每个样品设3个生物学重复,一共18个样本。
1. 体细胞胚发生的诱导
体细胞胚是指植物组织在外源激素的诱导下,虽没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物,即胚性愈伤组织。
2. 不同胚的转录组测序
作者根据胚发育不同阶段或形态的愈伤组织取样,即胚性愈伤组织(EC)、原胚(PE)、子叶胚(CE)、异常胚(AE)、成熟子叶胚(MCE)和枯萎异常胚(WAE),共6个样品,每个样品重复3次,共测序18个转录组。该部分写作也很套路,介绍了测序数据及unigenes组装、功能注释情况。
3. 橡胶树转录组差异表达分析
作者比较了不同发育阶段愈伤组织及不同状态的愈伤组织的差异基因。
进一步又按照上调和下调分析不同类型差异基因集。
4. 差异基因GO注释
该部分作者按照不同发育阶段愈伤组织和不同状态愈伤组织分别进行GO注释数据介绍。
5. 差异基因KEGG注释
该部分作者依然按照不同发育阶段愈伤组织和不同状态愈伤组织分别进行KEGG注释数据介绍。
6. 子叶胚(CE)与异常胚(AE)间激素信号通路相关差异基因分析
为了进一步了解激素调控相关基因表达模式与愈伤组织发育的关系,作者比较了正常子叶胚(CE)与异常胚(AE)间生长素(IAA)和脱落酸(ABA)激素信号通路相关基因的表达情况。
7. 子叶胚(CE)与异常胚(AE)间转录因子及愈伤组织发育相关基因表达
转录因子(Transcription factor, TFs)作为多功能调节因子在合子胚和愈伤组织发育中发挥着重要的激素信号转导和应激反应作用,所以作者进一步分析叶胚(CE)与异常胚(AE)间转录因子及愈伤组织发育相关基因表达情况。
8. 子叶胚(CE)与异常胚(AE)间组蛋白修饰相关基因的差异表达
植物生长调节剂和非生物胁迫对体细胞胚发育有一定影响,同时,这些因素可能诱导表观遗传修饰,组蛋白修饰是最重要的表观遗传修饰之一,因此作者继续分析了组蛋白修饰相关基因的表达水平。
9. 候选差异表达基因qPCR验证
作者选了20个与体细胞胚发育相关基因进行了QPCR验证。
以上就是该篇最新转录组文章全部分析内容,总结一下,其实内容也很简单,其中不乏老套的写作套路,如介绍测序、组装、功能注释等这些内容;但文章也有可取之处,首先实验设计较为合理,不仅有不同发育阶段的愈伤组织,更有异常胚(AE)、枯萎异常胚(WAE)等作为对比,能更好地筛选出与体细胞胚发育相关的基因;另一方面,挖掘转录因子、组蛋白表观遗传修饰相关基因也是该文章的亮点,值得借鉴!
总的来说,目前转录组发文章仍然不是很难,但仅是之前机械地展示结果肯定是行不通的,多一些个性化数据挖掘文章还是很好发的!
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