空间代谢组学(Spatial Metabolomics)是整合质谱成像(Mass Spectrometry Imaging,MSI)和代谢组学(Metabolomics)技术,对动/植物组织中代谢物的种类、含量和空间分布进行精准测定的技术,扩展了代谢组信息的维度,对生命科学的功能研究具有重要意义。得益于质谱仪器成像分辨率和检测灵敏度的提高,空间代谢组学突破了传统代谢组学信息维度不足的缺点,将组学信息拓展到了空间二维水平,极大地提升了对样品信息的认知。
质谱成像技术是一种结合质谱分析和影像可视化的分子成像技术,通常不需要标记,对生物组织样品可进行多点检测、多维数据获取,可实现不同分子高灵敏度的同时检测,并能够直接提供目标化合物的空间分布和分子结构信息。质谱成像技术可以实现生物组织中上千代谢物的定性、定量和定位分析,结合生物信息学分析,发展为空间代谢组学方法,可从生物组织原位发现差异代谢物,并识别其生物学功能。
与其他成像技术相比,MSI技术具有以下特点:
(1)通常无需标记,一次分析就可以得到多种化合物信息。
(2)既可以完成非靶标分析,也可以有针对性的实现高灵敏度的靶标分析。
(3)对多种分子成像,可以对多种非目标性物质同时进行成像分析。
(4)不仅可获得分子的空间分布信息,而且能够提供目标物质的分子结构信息。
1. 技术优势
(1)同时实现定性、定量和定位检测,获取代谢物的空间分布信息。
(2)单细胞级别的空间分辨率,可实现空间上5 μm的分辨。
(3)光学图像与质谱分析成像的融合,进一步提高了图像分辨率。
(4)与病理图像结合,不断获取更精确的结果,升级病理图像的判断。
2. 技术分类
质谱成像技术(MSI)是基于质谱发展起来的一种分子成像技术;按照离子源的不同,常把MSI分为三类:
(1)基质辅助激光/解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)
(2)二次离子质谱成像(SIMS)
(3)解吸电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)
其中,常用的是MALDI-MSI技术(基质辅助激光解吸电离质谱成像)和DESI-MSI技术,接下来简要讲解下两种技术。
MALDI-MSI 已成为当前最主流且应用最广泛的质谱成像技术。MALDI-MSI技术将分析物分散在基质分子中并形成共结晶,当用激光照射晶体时,由于基质分子经辐射吸收能量并导致迅速产热,使基质晶体升华;基质和分析物气化,分析物电离后进入质谱被检测,从而获得样本表面各像素点离子的质荷比和离子强度;与质谱成像软件结合,获得对应离子的信号强度和其在样本表面的位置,绘制出对应分子或离子在样本表面的二维分布图。
DESI-MSI技术基本原理是液滴萃取、样品解析机制,雾化溶剂液滴冲击组织切片表面,使待分析物直接解吸和电离形成气相离子的过程,然后离子进入质谱接口进行检测。
MALDI-MSI和DESI-MSI技术由于原理不同,各具优劣势。DESI-MSI技术开放环境,无需复杂的样品前处理,无需基质,但空间分辨率低,信号易受外界环境干扰。MALDI-MSI需要对样品进行处理,喷涂基质,样品可以保存的更好,空间分辨率高,结果更为稳定。
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