BInGO为cytoscape软件的插件,因此要使用BinGO,应先安装cytoscape。
cytoscape的安装非常简单,由于cytoscape为java软件,安装之前在自己的电脑中提前安装java 的JDK 安装方法见:https://www.omicsclass.com/article/298
之后到cytoscape官网下载最新版本安装就好:http://www.cytoscape.org/
在主菜单找到Apps manager:
再找到BinGO安装就好了,时间可能有点久耐心等待一会:
还是在 Apps找到刚才安装的BiNGO,点开:
使用之前先下载物种最新的GO注释文件,以拟南芥为例:
http://geneontology.org/page/downloads
找到拟南芥,这个注释文件包含的两列对这里的分析是有用的,分别是Gene ID和GO 功能注释。但文件还包含了其他信息,如symbol,基因的物理坐标信息,UniProt ID等:
将刚刚下载的gene_association.tair 导入到 BiNGO中
设置GO功能注释分类文件,下载地址:http://geneontology.org/page/downloads
相同界面,点选Ontology 在界面内,找到“go-basic.obo”并下载
“go-basic.obo”可以使用文本文件打开。里面记录了GO term 间的关系,依据这些关系,GO term最终将被化成网络图的形式。找到 select ontology file的窗口,选择custom,然后导入。
1.点击Paste Genes from Test,然后将待富集的基因的名称复制到内容框中(用空格或换行符分开)。这里使用拟南芥的10个基因来测试(10个蛋白激酶):At1g17240 At1g17250 At1g18890 At1g74740 AT2G02780 At2g26980 AT3G03770 At3g45640 AT4G33950 At5g01810 AT5G14210 AT5G63410 。其他选择默认参数,然后点击“Start BiNGO”运行。
一个文件属于弹窗,另一个存储在输出文件夹中(内容相同)。P值请参考 “Corr p-val”。第五列和第六列列出了这类功能基因在目标基因集合和全基因组基因中的比例。
另外GO分析网络图结果,颜色越深越富集,下面的表格为详细的富集信息:
xx:目标基因中此类基因的个数;
X:目标基因的总个数;
nn:基因组中此类基因的个数;
N:基因组基因的总个数
最后,如果是非模式物种就要自己准备物种所有基因的GO注释文件:
第一行固定,下面为物种所有基因对应的GO号,注意前面的GO:省略,可以用blast2GO,或者InterProScan得到。
然后输入到Select organism/annotation运行:
结果如下:
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