芯片RNA降解图
RNA的降解是影响芯片数据质量的一个很重要因素,一般,RNA从5端开始降解,所以理论上探针5端的荧光强度应该低于3端。
RNA降解曲线的斜率表示了这种变化趋势,斜率越小,说明降解越少,
如果斜率太小,甚至接近0,就要特别注意,则可能全部降解
以affymetrix芯片CEL文件为基础,获取AffyBatch后基于affy包的AffyRNAdeg函数,可以获取RNA降解情况(GSE66196)
RNAdeg=AffyRNAdeg(AffyBatch)
> summaryAffyRNAdeg(RNAdeg)
GSM1616746_Pool_1_Hilscher_26-07-2012.CEL.gz GSM1616747_Pool_1_Reif-Hilscher_8-2-2012.CEL.gz
slope 4.30e+00 4.07e+00
pvalue 3.61e-11 1.96e-11
GSM1616748_Pool_1wdh_Reif-Hilscher_9-2-2012.CEL.gz GSM1616749_Pool_2_Hilscher_26-07-2012.CEL.gz
slope 4.03e+00 4.29e+00
pvalue 1.93e-11 3.55e-11
GSM1616750_Pool_2_Reif-Hilscher_8-2-2012.CEL.gz GSM1616751_Pool_2wdh_Reif-Hilscher_9-2-2012.CEL.gz
slope 3.98e+00 4.09e+00
pvalue 8.56e-11 1.44e-11
GSM1616752_Pool_3_Hilscher_26-07-2012.CEL.gz GSM1616753_Pool_3_Reif-Hilscher_8-2-2012.CEL.gz
slope 4.24e+00 3.94e+00
pvalue 1.19e-11 1.26e-11
GSM1616754_Pool_3wdh_Reif-Hilscher_9-2-2012.CEL.gz GSM1616755_Pool_4_Hilscher_26-07-2012.CEL.gz
slope 3.92e+00 4.43e+00
pvalue 1.91e-11 1.82e-12
GSM1616756_Pool_4_Reif-Hilscher_8-2-2012.CEL.gz GSM1616757_Pool_4wdh_Reif-Hilscher_9-2-2012.CEL.gz
slope 3.95e+00 3.94e+00
pvalue
绘图:
> SampleNames
[1] "GSM1616746" "GSM1616747" "GSM1616748" "GSM1616749" "GSM1616750" "GSM1616751" "GSM1616752" "GSM1616753" "GSM1616754" "GSM1616755"
[11] "GSM1616756" "GSM1616757"
n.sample = length(AffyBatch$sample)
cols = rainbow(n.sample)
plotAffyRNAdeg(RNAdeg,cols= cols)
legend("topleft",legend=SampleNames,col= cols,lty=1,box.lty=0,bg=NA)
box()
注意:各芯片结果线条平行,说明实验处理均衡一致,如某个芯片和其他芯片差别较大需要注意是否存在问题。
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