三代全长转录组针对有参和无参都适用。 有参的可以鉴定异构体,分析可变剪切等 无参的可以做为参考,构建全长转录本。 更多生物信息课程: 1. 文章越来越难发?是你没发现新思路,基因家族分析发2-4分文章简单快速,学习链接:基因家族分析实操课程、基因家族文献思路解读 2. 转录组数据理解不深入?图表看不懂?点击...
回答于 2018-08-17 10:49
目前三代有两种:一种是很多公司低价在推的,建一个混合文库,不区分片段大小,这样成本低,但是检测出来的短片端转录本会很多;另一种是建两个文库,1-4k、4-10k。 更多生物信息课程: 1. 文章越来越难发?是你没发现新思路,基因家族分析发2-4分文章简单快速,学习链接:基因家族分析实操课程、基因家族文献思路解读...
回答于 2018-08-10 06:39
unigene是转录本的子集。首先通过triniy组装出来的视为转录本,然后挑选最长的一条转录本作为unigene。 更多生物信息课程: 1. 文章越来越难发?是你没发现新思路,基因家族分析发2-4分文章简单快速,学习链接:基因家族分析实操课程、基因家族文献思路解读 2. 转录组数据理解不深入?图表看不懂?点击链接学习深入解...
回答于 2018-08-08 15:40
没有参考基因组的物种也可以做蛋白质组学分析,一般我们会先看其近缘物种有没有参考基因组,如果有的话,可以考虑使用。或者我们对所测样品做一个转录组测序,使用转录组构建一个简易的蛋白库作为数据库使用。如果二者都没有的话,那就不建议做了,结果会非常不准确的。
回答于 2018-08-02 17:30
不同老师的样品或者同一个老师不同实验的样品,都不能放在一组上机。 原因:不同的物种的话,在搜库的时候选择的数据库不一样,无法进行搜库比较。 同一个物种的不同处理的话,那么经过不同实验室处理后,样品里的蛋白含量和数目会有较大差别,混在一起后会影响两组不同来源的样品的蛋白鉴定数目
回答于 2018-07-28 16:40
iTRAQ和TMT是两种不同的定量技术,其实二者只是不同厂家生产的(iTRAQ是AB SCIEX研发,TMT是Thermo Fisher研发),在标记规格、标签分子结构上有些许差异,其他原理基本一样。 在可以混标的数量上,Itraq是4标和8标的,TMT是2、6、10标的。 Itraq的报告基团113-121,中间没有120,一共8个 TMT的报告基团是126-131,其中1...
回答于 2018-07-28 16:36
所谓搭桥就是内参。 由于itraq或tmt技术上的限制,最多标记10个样品,所以,当样品数超过10个的时候就需要设置内参,以矫正不同批次之间的批次差异。 比如:做18个样品,则可以做成两个10标的,每组9个样品加1个内参(内参是多个样品的混样),总共需要做的样品数就是9+9+1+1=20个。 当然,设置内参需要考虑的因素很多,...
回答于 2018-07-26 12:00
目前公司分析大多数是按照差异倍数2倍进行分析的,但是由于差异蛋白的数目一般不会很多,所以我们要根据实际情况,对差异倍数做出合适的调整,前提是差异是真实存在的即可。在文章发表当中,没有谁规定差异倍数必须是多少。 其实在转录组测序中也没有硬性规定。 我们做分析的时候要学会灵活处理,不要墨守成规!合适的才...
回答于 2018-07-25 20:56
在外泌体研究中,外泌体鉴定是继分离之后的又一关键步骤。分离到的“外泌体”是否有较典型的外泌体结构?是否表达特异性的外泌体表面Marker?大小是否落在外泌体常规的粒径范围?这些都是外泌体研究所需要考虑的问题。一般情况下,研究者会综合运用各种检测手段来对分离物进行最终界定,而在这些手段中,外泌体透射电镜观察以...
回答于 2018-07-16 10:36
iTRAQ/TMT特点: 1. 通量高,平行比较多达10个样品; 2. 灵敏度高,重复性好; 3. 覆盖度高。 Label free特点: 1. 无需同位素标记试剂; 2. 不受样本条件的限制,但准确性受到质谱重复性等因素的影响。 更多生物信息课程: 1. 文章越来越难发?是你没发现新思路,基因家族分析发2-4分文...
回答于 2018-07-16 10:33