我做了个无参考基因组昆虫的转录组,公司先对所有样品的数据进行了拼接,形成一个unigene库,然后再把每个样品的数据回比到unigene库上,得到一个回比率,我这里是55%,感觉有点低啊,什么原因造成的呢?
55%的回比率确实不怎么高,一般来说影响回比率的因素有以下几条:
1. unigene库的拼接质量,这个又和物种基因组本身有关,如果杂合度太高,拼接难度也就增大了;
2 . 样品间差异,如果样品间或者说组间差异比较大,那么unigene库相对于每个单个样品来说,特异序列占比就高了,自然回比率也就下去了;
3. 分析人员、分析软件调试问题,如果是交给公司来做的,一般是不会出问题的,毕竟他们天天在做项目。
最后建议你重点看看差异分析结果里有没有符合预期的信息,如果有的话,55%的回比率也是可以接受的。